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Ca++Mg++ ——ATP酶测试盒可见分光光度法
50 管/24 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
Ca++ Mg++-ATP 酶广泛分布于植物、动物、微生物和细胞中,可催化 ATP 水解生成 ADP 和无机磷。
测定原理:
根据 Ca++ Mg++-ATP 酶分解 ATP 生成 ADP 及无机磷,通过测定无机磷的量来确定 ATP 酶活性高低。
需自备的仪器及用品:
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸
馏水。
试剂的组成和配制:
提取液: 液体 50mL ×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 10尘尝×1 瓶,4℃保存。
试剂二:液体 5尘尝×1 瓶,4℃保存。
试剂叁:液体 5尘濒×1 瓶,4℃保存。
试剂四:粉剂×3 支,-20℃保存。用时每支加 1mL 蒸馏水,现用现配;用不完的试剂分装
后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂五:液体 5尘尝×1 瓶,4℃保存。
试剂六:粉剂×1 瓶,4℃保存。用时加入 3mL 蒸馏水, 4℃保存。
试剂七:粉剂×1 瓶, 4℃保存。用时加入 25mL 蒸馏水,溶解后 4℃保存一周。
试剂八:粉剂×1 瓶, 4℃保存。用时加入 25mL 蒸馏水,溶解后 4℃保存一周。
试剂九:液体 25尘尝×1 瓶,室温保存。
试剂十:10mmol/L 标准磷贮备液 10尘尝×1 瓶,4℃保存。
0.5μ尘辞濒/尘尝 标准磷应用液配制:将试剂十 20 倍稀释,即取 0.1mL 试剂十加 1.9mL 蒸馏水充分混匀。
定磷剂的配制:按 H2O: 试剂七:试剂八:试剂九=2:1:1:1 的比例配制,配好的定磷剂应为浅黄色。若无色则试剂失效,若是蓝色则为磷污染,定磷剂现用现配。
注意:配试剂最好用新的烧杯、玻棒和玻璃移液器,也可以用一次性塑料器皿,避免磷污染。
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