线粒体呼吸链复合体Ⅰ/狈础顿贬辅酶蚕还原酶测试盒紫外分光光度法
25 管/24 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义
复合体Ⅰ(EC 1.6.5. 3)又称 NADH-CoQ 还原酶或 NADH 脱氢酶,广泛存在于动物、植物、
微生物和培养细胞的线粒体中,是线粒体内膜中最大的蛋白复合物。该酶催化一对电子从
NADH 传递给 CoQ,同时可使 O2还原生成 O2.-,是呼吸电子传递链上产生 O2.-的主要部位。
测定该酶活性,不仅可以反映呼吸电子传递链(ETC)状态,而且可以反映活性氧(ROS)
生成状态。
测定原理
复合体Ⅰ能够催化 NADH 脱氢生成 NAD+,在 340nm 下测定 NADH 的氧化速率计算出该酶
活性的大小。
需自备的仪器和用品
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 石英比色皿、研钵、冰和蒸
馏水。
试剂的组成和配制
试剂一:25尘尝×1 瓶,-20℃保存;
试剂二:5尘尝×1 瓶,-20℃保存;
试剂叁:0.5 mL×1 瓶,-20℃保存;
试剂四:25尘尝×1 瓶,-20℃保存;
试剂五:1 mL×1 支,-20℃保存;
试剂六:粉剂×1 支,-20℃保存,用时加入 2mL 蒸馏水;用不完的试剂分装后-20℃保存,
禁止反复冻融。
工作液的配制:临用前将试剂五转移到试剂四中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,
禁止反复冻融。
