转氢酶1测试盒紫外分光光度法
50 管/48 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义
TH 位于线粒体的内膜上,又称为呼吸电子传递链复合体六,催化 NADH+NADP+和
NAD++NADPH 相互转化。催化正向反应称为 TH-1。线粒体 NADH 含量增加时会导致线粒
体膜的 H+电化学梯度升高,因而促进了电子传递链上 ROS 的产生。TH-1 促进 NADH 转换
为 NADPH,从而提高线粒体的抗氧化能力。
测定原理
NADH 和 NADPH 均在 340nm 有特征吸收,因此 TH 催化的转氢反应不能导致 340nm
吸光度发生变化。用人工合成底物 3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸磷酸(APADP+)替代 NADP+,
TH-1 催化 APADP+还原生成的 APADPH 在 375nm 有特征光吸收,因此通过测定 375nm 光
吸收增加速率,来计算 TH-1 活性。
需自备的仪器和用品
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸
馏水。
试剂的组成和配制
试剂一:液体 50尘尝×1 瓶,-20℃保存;
试剂二:液体 25尘尝×1 瓶,-20℃保存;
试剂叁:液体 25尘尝×2 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 支,-20℃保存;
试剂五:粉剂×2 支,-20℃保存;
