转氢酶2测试盒紫外分光光度法
50 管/48 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义
TH 位于线粒体的内膜上,又称为线粒体复合体六,催化 NADH+NADP+和 NAD++NADPH
相互转化,调节线粒体 NAD(H)和 NADP(H)平衡。把逆向反应称为 TH-2,催化 NADPH 和
NAD+生成 NADP+和 NADH。
测定原理
NADH 和 NADPH 均在 340nm 有特征吸收,因此 TH 催化的转氢反应不能导致 340nm 吸光
度发生变化。用人工合成底物 3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸(APAD+)替代 NAD+,TH-2 催
化 APAD+还原生成 APADH,APADH 在 375nm 有特征光吸收,测定 375nm 光吸收的增加速
率,来计算 TH-2 活性。
需自备的仪器和用品
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸
馏水。
试剂的组成和配制
试剂一:液体 50尘尝×1 瓶,-20℃保存;
试剂二:液体 25尘尝×1 瓶,-20℃保存;
试剂叁:液体 25尘尝×2 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 支,-20℃保存;
试剂五:粉剂×2 支,-20℃保存
