碱性蛋白酶测试盒可见分光光度法
分光光度法 50 管/24 样
注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
AKP 是指在碱性条件下催化蛋白质肽键水解的酶类,属于丝氨酸蛋白酶。此外,该酶还能
够水解酯键、酰胺键,具有转酯及转肽的功能。该酶是主要工业用酶之一,广泛应用于制药、
丝绸、食品、制革等行业。
测定原理:
在碱性条件下,AKP 水解酪蛋白生成酪氨酸;在碱性条件下,酪氨酸还原磷钼酸生成钨蓝;
钨蓝在 680nm 有特征吸收峰,测定 680nm 吸光度增加速率,来计算 AKP 活性。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、1.5 mL EP 管、1mL 玻璃比色皿和
蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:液体 90尘尝×1 瓶,4℃保存。
试剂二:粉剂×1 瓶,4℃保存。临用前加 10 mL 蒸馏水溶解。
试剂叁:粉剂×1 瓶,4℃避光保存。临用前加入 20 mL 试剂一,沸水浴中磁力搅拌溶解。(可
在烧杯上盖一层保鲜膜,注意观察,避免水分全部蒸发,一般加热 15-30 分钟,该试剂为过
饱和试剂,充分混匀后仍出现颗粒物不溶物不影响使用)。
试剂四:粉剂×1 瓶, 4℃保存。临用前加 50 mL 蒸馏水溶解。
试剂五:液体 10尘尝×1 瓶,4℃保存。
标准品:液体 1尘尝×1 支,0.25 μ mol/mL 标准酪氨酸溶液,4℃保存
