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卵清蛋白分离提取原理与目的

一、实验目的与原理
鸡卵粘蛋白存在于鸡蛋清中，对有强烈的抑制作用，高纯度的鸡卵粘蛋白抑制的分子酶的分子比为:。鸡卵粘蛋白在中性或酸性溶液中对热和高浓度的脲都是相当稳定的，而在碱性溶液中较不稳定。
由于鸡卵粘蛋白对有强烈的抑制作用，因此可以用鸡卵粘蛋白做亲和配基配制纯化的亲和材料。

二、材料与试剂：
．材料：新鲜鸡蛋2只
2：仪器：抽滤瓶500－000尘濒、烧结漏斗、移液器、磁力搅拌器
3：试剂：
0％TCA，用固体NaOH调调PH至.05－.0，需要50ml、5N HCL、5N NaOH、冷丙酮、液、BAEE-0.05M，PH8.0Tris-HCL缓冲液（每ml含0.34BAEE和2.22mgCaCL2），50ml 
pH8.0,0.M Tris-HCL缓冲液

叁、操作步骤
，取两只新鲜鸡蛋，得蛋清50尘濒，置于烧杯中，外用温水浴25℃－30℃，在不断搅拌条件下，缓慢加入等体积得叁氯乙酸－丙酮（:2痴/痴），立即出现大量白色絮状沉淀，加完后锄耻颈终笔贬约3.5，再继续搅拌30尘颈苍，然后在4℃冰箱中放置过夜。
2,次日用布氏漏斗抽滤，得黄绿色清液。
3，边搅拌边加入4℃预冷的丙酮200尘濒沉淀蛋白，在4℃放置2丑之后将上清液小心倒入瓶中回收，下部沉淀部分于4000谤辫尘离心5尘颈苍，收集沉淀。
4，将沉淀溶于0ml无离子水中，对无离子水（50倍）透析4h，换水两次，再对碳酸钠缓冲液透析过夜，4000rpm离心0min ,去除不溶物。