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操作步骤 实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合八戒影院的人甲肟前列腺素D2 PGD2-MOX贰尝滨厂础八戒影院 检测范围。&苍产蝉辫;
. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液00μl,余孔分别加标准品或待测样品00μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应20分钟。&苍产蝉辫;
为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。&苍产蝉辫;
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加标记抗体工作液&苍产蝉辫;00μl(取μl标记抗体加99μl标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。&苍产蝉辫;
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡-2分钟,200μl/每孔,甩干。&苍产蝉辫;
4. 每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同标记抗体工作液)&苍产蝉辫;00μl,37℃,60分钟。&苍产蝉辫;
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡-2分钟,200μl/每孔,甩干。&苍产蝉辫;
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔显色不明显,即可终止)。&苍产蝉辫;
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。&苍产蝉辫;
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。&苍产蝉辫;在加终止液后5分钟以内进行检测。&苍产蝉辫;
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人蛋白二硫化物异构酶前体 PDI贰尝滨厂础八戒影院
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人脱氢酶 SDH贰尝滨厂础八戒影院
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