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乙酰辅酶础测试盒紫外分光光度法
50 管/48 样 25管/24样 10管/9样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义
乙酰辅酶 A 广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中。是生物体能源物质代谢过程中
产生的一种重要的中间代谢产物。在体内能源物质代谢中是一个枢纽性的物质。糖、脂肪、
蛋白质三大营养物质通过乙酰辅酶 A 汇聚成一条共同的代谢通路-三羧酸循环和氧化磷酸
化，经过这条通路彻底氧化生成二氧化碳和水，释放能量用于 ATP 合成。此外，乙酰辅酶
A 是合成脂肪酸，酮体，胆固醇及其衍生物等生理活性物质的前体物质。
测定原理
苹果酸脱氢酶可催化苹果酸和 NAD 生成草酰乙酸和 NADH。柠檬酸合酶可催化乙酰辅酶 A
和草酰乙酸生成柠檬酸和辅酶 A。利用苹果酸脱氢酶和柠檬酸合酶的偶联反应，乙酰辅酶 A
含量和 NADH 的生成速率成正比，340nm 下吸光值的上升速率反应了乙酰辅酶 A 含量的高
低。
需自备的仪器和用品
紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL 石英比色皿、研钵、冰和蒸
馏水。
试剂的组成和配制
试剂一：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。
试剂二：粉剂×1 支，-20℃保存。临用前加入 500μL 试剂五充分溶解备用；用不完的试剂分
装后-20℃保存，禁止反复冻融。
试剂三：液体 20μL×1 支，4℃保存。临用前加入 500μL 试剂五充分溶解备用；用不完的试
剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
试剂四：粉剂×1 瓶，-20℃保存。临用前加入 45mL 试剂五充分溶解备用；用不完的试剂分
装后-20℃保存，禁止反复冻融。
试剂五：液体 60mL×1 瓶，4℃保存。
工作液的配制：临用前请根据拟用工作液体积（样本数×0.92 m L），将试剂二、三和四按
照 1:1:90 的比例混合，或者直接把试剂二和试剂三加入到试剂四中混匀（可以测定 48 样）；
加样前置 37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）水浴锅中预热 30 min；现配现用；
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