磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(笔贰笔颁)测试盒紫外分光光度法
50 管/48 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
PEPC(EC 4.1.1.31)广泛存在于动物、植物、微生物和细胞中,是催化磷酸烯醇式丙酮酸
与二氧化碳反应生成草酰乙酸呈不可逆反应的酶,对叁羧酸循环的运转起重要调节作用。
测定原理:
PEPC 催化磷酸烯醇式丙酮酸和 CO2生成草酰乙酸和 HPO42-,苹果酸脱氢酶进一步催化草
酰乙酸和 NADH 生成苹果酸和 NAD+,在 340nm 测定 NADH 减少速率,计算 PEPC 活性。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL 石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制:
提取液:60尘尝×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 30 mL×1 瓶, 4℃保存;
试剂二:液体 10 mL×1 瓶, 4℃保存;
试剂叁:粉剂×2 支,-20℃保存,临用前加入 4mL 蒸馏水充分溶解待用;现配现用。
试剂四:粉剂×1 支,-20℃保存,临用前加入 5mL 蒸馏水充分溶解待用;用不完的试剂分装
后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂五 :原液 20μ尝×1 支,4℃保存;
试剂五:稀释液 10尘尝×1 瓶,4℃保存;
