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辅酶Ⅱ狈础顿笔(贬)含量测试盒可见分光光度法
分光光度法 50 管/24 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义
辅酶ⅡNADP(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,NADP +和 NADPH 含量测 定可以计算 NADP(NADPH + NADP + )含量和 NADPH/NADP +比值,其变化与磷酸戊糖途 径和生物合成以及抗氧化反应密切相关。NADPH/NADP +比值不仅是细胞氧化还原态的主要 标志之一,而且在 PPP 途径、生物合成和抗氧化代谢中具有重要调控作用。
测定原理&苍产蝉辫;
分别用酸性和碱性提取液提取样品中 NADP +和 NADPH。NADPH 通过 PMS 的递氢作用, 使氧化型噻唑蓝(MTT)还原为甲瓒,570nm 下检测吸光值,从而测定 NADPH 含量。利 用 6-磷酸葡萄糖脱氢酶还原 NADP +为 NADPH,从而检测 NADP +含量。
&苍产蝉辫;所需的仪器和用品
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
&苍产蝉辫;试剂的组成和配制
酸性提取液:50mL×1 瓶,4℃保存;
碱性提取液:50mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1 支,-20 ℃保存,用时加入 4mL 蒸馏水,混匀;用不完的试剂 4℃保存一周;
试剂三:粉剂×1 支,-20℃保存,用时加入 4mL 蒸馏水,混匀;用不完的试剂 4℃保存一周;
试剂四:粉剂×1 支,4 ℃保存,用时加入 4mL 蒸馏水,混匀;用不完的试剂 4℃保存一周;
试剂五:液体 1.8mL×1 支,4 ℃保存;
试剂六:液体 30mL×1 瓶,4 ℃保存;
试剂七:液体 50mL×1 瓶,4 ℃保存。
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