狈础顿笔磷酸酶(狈础顿笔补蝉别)测试盒可见分光光度法
分光光度法 50 管/48 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
NADPase 主要存在于植物组织中,是生物体内唯一催化 NADP+降解为 NAD+的酶,与 NADK
一起调控 NAD 和 NADP 之间的平衡。
测定原理:
NADPase 能够催化 NADP+水解为 NAD+和无机磷的反应,通过测定无机磷的量来测定
NADPase 活性。
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL 玻璃比色皿、研钵、冰
和蒸馏水
试剂的组成和配制:
提取液:60尘尝×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 30 mL×1 瓶, 4℃保存。
试剂二:粉剂×5 支,-20℃保存;用时每支加入 1 mL 试剂一充分溶解备用;用不完的试剂
分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂叁:粉剂×1 瓶, 4℃保存。用时加入 25mL 蒸馏水,溶解后 4℃可保存一周。
试剂四:粉剂×1 瓶, 4℃保存。用时加入 25mL 蒸馏水,溶解后 4℃可保存一周。
试剂五:液体 25尘尝×1 瓶,室温保存。
试剂六:10mmol/L 标准磷贮备液 10尘尝×1 瓶,4℃保存。
0.5μ尘辞濒/尘尝 标准磷应用液配制:将试剂六 20 倍稀释,即取 0.5mL 试剂六加 9.5 蒸馏水,
充分混匀。
定磷试剂的配制:按 H2O: 试剂叁:试剂四:试剂五=2:1:1:1 的比例配制,配好的定磷试剂
应为浅黄色,若无色则试剂失效,若是蓝色则为磷污染,定磷剂现用现配。
注意:配试剂最好用新的烧杯、玻棒和玻璃移液器,也可以用一次性塑料器皿,避免磷污染。
