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产物名称：木糖基转移酶Ⅰ(XYLT1)重组蛋白(Human，人)
物种：Homo sapiens
(Human，人)
英文名称：Recombinant
Xylosyltransferase I (XYLT1)
XT-I; XT1; PXYLT1; Protein O Xylosyltransferase 1
型号：GOY-01D2522
物种 | Homo sapiens (Human，人) |
来源 | 原核表达 |
宿主 | E.coli |
亚细胞定位 | 分泌 |
预测分子量 | 19.0kDa |
实际分子量 | 19.0kDa(差异分析请参阅说明书) |
片段与标签 | Gly773~Val910 with N-terminal His Tag |
缓冲液成份 | 100mM NaHCO3, 500mM NaCl缓冲液（pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT,
0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300） |
性状 | 冻干粉 |
纯度 | > 90% |
内毒素水平 | <1.0EU/μg(LAL法测定) |
等电点 | 7.1 |
应用 | Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. |
规格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
Ⅰ 实体组织蛋白的提取
1．&苍产蝉辫;木糖基转移酶Ⅰ(XYLT1)重组蛋白(Human，人)在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂， 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。
2． 每100mg固体组织置于培养皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小块，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃匀浆器上下手动匀浆15次，注意低温操作；
3． 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管，离心10000转/分，4℃离心5 min；
4． 取上清转移至新的预冷的离心管中，即为全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
5． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
Ⅱ 培养细胞蛋白提取
1． 贴壁培养的细胞，吸去培养基后，加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次，每次振摇数次以尽量去除培养液；
2． 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞，将细胞及培养液移至离心管中， 1000转/分离心10 min，再用10mL/150mm培养板的冷PBS，1000转/分离心5 min洗两次；
3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂， 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。
4． 细胞洗涤后，转至新的预冷的离心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：
5．置于4℃摇床平台上，温和振荡15 min；
6． 14,000rpm，4℃离心15min，取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）
7． 分装保存于-70℃,避免反复冻融
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