八戒影院

    &苍产蝉辫;优化贰尝滨厂础的重点之一在于洗涤。洗涤步骤可降低未结合抗体所引起的背景信号，从而增加分析的信噪比。每一步之间的洗涤确保只有特异的结合事件被保留，在最后一步产生信号。而不充分的洗涤会导致差异和高背景，从而带来不理想的结果。

    在做ELISA实验时，洗板有两种方法：手工法洗板 和 洗板机洗板。二者没有本质的差别，只要操作合乎要求，均能得到正确、可靠的结果。然而，在实际操作中，选择何种洗涤方式往往取决于实验者的具体需求与条件。手工法洗板虽然操作相对繁琐，需要实验者耐心细致地逐孔加入洗涤液并轻轻拍干，但它在小规模实验或资源有限的情况下尤为适用。此外，手工法允许实验者根据具体情况调整洗涤力度和次数，对于一些特别敏感或易脱落的样本，可能更具灵活性。

洗板机洗板人为因素少，速度快，条件恒定，但是使用洗板机洗板时应注意以下叁个关键点。

洗涤参数

       主要的参数是洗涤量。自动洗板机会分配洗涤液。如果你之前遭遇过高背景，那么不要犹豫，将洗涤量调为高，最好是比包被体积更高。太少的洗涤液会让一部分分析表面洗涤不到，从而明显增加背景。所有反应孔的洗涤量必须相同。

       我们建议使用350?l洗涤液进行洗涤，以便清洁整个反应孔的壁。一般来说，洗涤量越高，则孵育步骤残留的抗体或抗原量就越少。

洗涤次数

       影响洗涤效果的主要参数是洗涤循环的量。当然，洗涤次数越多，背景越低。然而，太多次的洗涤会降低信号强度，使其难以测定。通常的做法是在每次抗体或抗原孵育后重复洗涤三次。不过，一般而言，包被平板需要的洗涤次数比用户包被的平板要少。对于用户包被的ELISA板，必须优化洗涤次数。

      控制洗涤量和洗涤次数的另一种方法是加入过量的洗涤液。一般来说，96孔板的每个孔能容纳330至460 ?l。不过，有些自动化洗板机可设置程序，分配远远超出这个量的洗涤液，比如1 ml。它是如何做到的呢？其实很简单，就是在分液的同时打开吸液功能。换句话说，随着分液器分配更多的液体，抽吸器也将液体吸出。这种技术能增加洗涤量，但不会溢出到其他孔中。

抽  吸

      还有一些参数会影响洗涤步骤的效果。这些参数包括吸液高度和吸入位置，这两者都能调整，以降低背景（残留量）和差异。

      残留液体中包含未结合的抗原或抗体，它们会增加背景信号。残留量越小，残留液体越少，转移到下一步的干扰液体也就越少。

      吸液高度会明显影响残留量；如果洗涤吸头与反应孔底部的距离稍大，那就会让残留量急剧增加。反之，如果洗涤吸头压着反应孔底部，那么也会使吸液效率降低，残留量增加。

      目前的洗板机一般使用两种类型的洗头：刚性和浮动。浮动洗头中的吸头可在洗涤过程中自由上下移动，而刚性洗头则固定在适当的位置。使用刚性洗头的洗涤操作在优化起来更为复杂，因为你需要非常仔细地调整吸液高度。如果你们实验室使用几种不同的板，那可能会很耗时。在使用浮动洗头时，吸头会降到反应孔的底部。调整高度就不是很重要，因此洗头会下降到底部。

抽吸的位置也对残留量有着重要影响；如果每个孔只使用一个抽吸点（这很常见，因为更快），那么抽吸的位置需要优化。最佳的位置取决于洗头的性状，但它几乎不在反应孔的中间，即使这是所有洗头最常见的默认位置。一般来说，最佳位置在孔中间与孔壁之间的某处。

反应孔的形状也会影响残留量。颁形底（平底圆角）的微孔板一般会比那些平底尖角的微孔板残留量更低。

洗板时还应注意

1.  需每天校正注液量及残液量，洗涤后残液量不得大于2 μl。

2.  及时更换破损吸液针，避免破坏底板包被。

3.  针对不同厂家酶标板注意调整吸液头下降高度，避免冲洗针头卡住酶标板。

4.  注意调整洗液量，洗液量过多将溢出，过少将达不到洗涤效果。

5.  关机前使用蒸馏水冲洗管道，避免洗液的结晶物堵塞管道。

4.  不同种八戒影院的洗液严禁混合使用。

为了洗涤效果较好，实验室可采用机器与人工洗涤相结合的方法，在机器洗涤后再进行人工洗板1～2次，能达到理想的洗涤效果。贰尝滨厂础看起来很简单，但是在实际操作过程中，绝不能掉以轻心，除了严谨规范的实验操作，高品质的八戒影院与专业的技术团队也是获得准确结果的保证！