别濒颈蝉补八戒影院分享在实验中种属通用操作步骤
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贰尝滨厂础八戒影院操作步骤(通用):
. 加标准品:在酶标包被板上设标准品孔,贰尝滨厂础八戒影院 依次加入不同浓度的标准品50ul(建议每个浓度做2个平行孔)人贰尝滨厂础八戒影院。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。大鼠贰尝滨厂础八戒影院在酶标包被板上待测样品孔中先加样品40μl,然后再加样品亲和素0μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀人贰尝滨厂础八戒影院。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟贰尝滨厂础八戒影院。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,大鼠贰尝滨厂础八戒影院每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干小鼠贰尝滨厂础八戒影院。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外贰尝滨厂础八戒影院。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色5分钟人贰尝滨厂础八戒影院.
0. 终止:每孔加终止液50μl,贰尝滨厂础八戒影院终止反应(此时蓝色立转黄色)。
测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后5分钟以内进行。
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