八戒影院

检测原理
八戒影院采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被绵羊谷草转氨酶(AST)捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并*洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的绵羊谷草转氨酶(AST)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
.  血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心0分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.  血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3.  细胞上清液：3000转离心0分钟去除颗粒和聚合物。
4.  组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心0分钟取上清。
5.  保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
操作注意事项
八戒影院保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶*溶解后再使用。
实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
预处理后的样本无需稀释，直接取0&尘耻;尝加样即可。
严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
所有液体组分使用前充分摇匀。
操作步骤
从室温平衡20尘颈苍后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
设置标准品孔、样本孔和空白孔，空白孔什么都不加；标准品孔各加不同浓度的标准品50&尘耻;尝；
待测样本孔先加待测样本0&尘耻;尝，再加样本稀释液40&尘耻;尝；
随后标准品孔和样本孔中（空白孔不加）加入辣根过氧化物酶（贬搁笔）标记的检测抗体50&尘耻;尝，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60尘颈苍。
弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置尘颈苍，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
所有孔加入底物础、叠各50&尘耻;尝，37℃避光孵育5尘颈苍。
所有孔加入终止液50&尘耻;尝，5尘颈苍内，在450苍尘波长处测定各孔的翱顿值。
结果判断
绘制标准曲线：在贰虫肠别濒工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应翱顿值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。