操作步骤
. 标准品的稀释:本八戒影院提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
60 U/L 5 号标准品 50μl的原倍标准品加入50μl标准品稀释液
80 U/L 4 号标准品 50μl的5 号标准品加入50μl标准品稀释液
40 U/L 3 号标准品 50μl的4 号标准品加入50μl标准品稀释液
20 U/L 2 号标准品 50μl的3 号标准品加入50μl标准品稀释液
0 U/L 号标准品 50μl的2 号标准品加入50μl标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,
然后再加待测样品0&尘耻;濒(样品锄耻颈终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽
量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此
重复 5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同 3。
8. 洗涤:操作同 5。
9. 显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
5 分钟.
0. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止
液后 5分钟以内进行。
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