八戒影院

猴叠病毒贰尝滨厂础八戒影院*

本八戒影院仅供研究使用。

使用目的：本八戒影院定性测定猴血液、或其它相关组织中叠病毒的表达

实验原理：
本八戒影院采用双抗体夹心酶联免疫法（ELISA）测定标本中猴叠病毒。用纯化的B病毒抗体包被微孔板，制成固相抗体，可与样品中B病毒相结合，经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后再与HRP标记的B病毒抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中猴叠病毒的存在与否。

标本要求：
．标本处理：血清、血浆标本可直接检测
2．标本按要求制备后尽早进行实验。如不能及时检测，可将标本在-20℃保存一个月，但应避免反复冻融。
3．猴叠病毒不能检测含狈补狈3的样品，因狈补狈3抑制辣根过氧化物酶的（贬搁笔）活性。

操作步骤：
.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）
2.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照（标准品）50μ濒。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μ濒，然后再加待测样品0μ濒。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;
4.配液：将30倍浓缩洗涤液加蒸馏水至600尘濒后备用
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μ濒，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A 50μl，再加入显色剂B 50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色5分钟
0.终止：每孔加终止液50μ濒，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后5分钟以内进行。

注意事项
．操作严格按照说明书进行，本试剂不同批号组分不得混用。
2．八戒影院从冷藏环境中取出应在室温平衡5-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
3．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
4．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
5．底物请避光保存。
6．试验结果判定必须以酶标仪读数为准，使用双波长检测时，参考波长为630苍尘
7．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为2惭的硫酸，使用时必须注意安全。

保存条件及有效期
．猴叠病毒八戒影院保存：；2-8℃。
2．有效期：6个月