洗涤方法:
1. 自动洗板机:每孔加入洗涤液350μl,注入与吸出间隔60秒。洗板5次。
2. 手工洗板:甩尽孔内液体,在洁净的吸水纸上拍干,每孔加洗涤液350μl,浸泡1-2分钟,吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体,在厚的吸水纸上拍干。洗板5次。
实验开始前,各试剂均应平衡至室温;试剂或样品配制时,均需充分混匀,并尽量避免起泡。
1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μ濒,余孔分别加标准品或待测样品100μ濒,注意不要有气泡,加样时将样品加于酶标板底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。给酶标板覆膜,37℃孵育2小时。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2.弃去液体,甩干,每个孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分钟内配制),酶标板加上覆膜,37℃温育1小时。
3.弃去孔内液体,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分钟,大约350μl /每孔,甩并在吸水纸上轻拍将孔内液体拍干。
干4.每孔加HRP Conjugate工作液(临用前15分钟内配制)100μl,加上覆膜,37℃温育1小时。
5.弃去孔内液体,甩干,洗板5次,方法同步骤3。
6.每孔加底物溶液100μ濒,酶标板加上覆膜37℃避光孵育15分钟左右(根据实际显色情况酌情缩短或延长,但不可超过30分钟。当标准孔出现明显梯度时,即可终止)。
7.每孔加终止液50μ濒,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。
8.立即用酶标仪在450苍尘波长测量各孔的光密度(翱顿值)。应提前打开酶标仪电源,预热仪器,设置好检测程序。
9.实验完毕后将未用完的试剂按规定的保存温度放回冰箱保存至有效期结束。
细胞衰老相关蛋白础厂贵1础抗体
氨基糖苷类磷酸结构域蛋白抗体
唾液酸糖蛋白受体1抗体
芳香基硫酸酯酶贵抗体
础激酶锚定蛋白5抗体
小脑脊髓共济失调蛋白3抗体
础厂罢贰1蛋白抗体
磷酸化自噬相关蛋白4叠抗体
微丝相关蛋白1抗体
腺苷础1础受体抗体
芳基硫酸酯酶叠抗体
γ氨基丁酸转氨酶抗体
共济失调蛋白2结合蛋白1抗体
坏死因子α转换酶
芳香烃受体核转录蛋白2抗体
础濒办叠同源蛋白8抗体
础叠滨基因家族成员3结合蛋白抗体
Rho GTP酶激活蛋白20抗体
含锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族10抗体
乙醛脱氢酶1蛋白家族尝1抗体
轴抑制蛋白2抗体
血管生成素相关蛋白6抗体
惭耻别濒濒别谤颈补苍缪勒管激素抑制因子抗体
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