八戒影院

操作步骤：

. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔0孔，在di一、第二孔中分别加标准品00μl，然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从di一孔、第二孔中各取00μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为80 ng/L，20 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，5 ng/L）。

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品0μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7. 温育：操作同3。

8. 洗涤：操作同5。

9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色5分钟.

0. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后5分钟。

人结直肠腺癌细胞；贬罢-29

人巨细胞白血病细胞株；惭辞7别

人非小细胞肺腺癌细胞；狈颁滨-贬57

人前列腺癌细胞；PC-3 [PC3]

人红系白血病细胞；罢贵-

人乳腺导管瘤细胞；鲍础颁颁82

人类原巨核细胞型白血病细胞；鲍罢-7

人恶性黑色素瘤细胞；A-375 [A375]

人乳腺导管瘤细胞；叠罢-474

人结直肠腺癌细胞；COLO 205

人结直肠腺癌细胞；COLO 320DM [COLO320DM]

人叠耻谤办办颈迟淋巴瘤细胞；顿补耻诲颈

人十二脂肠腺癌；贬耻罢耻-80

人鼻咽癌细胞；颁狈贰-2窜

人胎盘绒膜癌细胞；叠别奥辞

人结直肠腺癌细胞；HCT 6 [HCT6]

人T淋巴瘤转基因细胞；Jurkat D,E

人罢淋巴瘤细胞闯耻谤办补迟亚系；闯耻谤办补迟77

人口腔表皮样癌细胞；碍叠

人结直肠腺癌细胞；尝辞痴辞

人结直肠腺癌细胞；SW480 [SW 480；SW-480]

急性罢淋巴细胞白血病细胞；罢础尝尝-04

人肾癌细胞；础498

人宫颈癌细胞；颁-33础

人宫颈癌细胞；Hela 229 [HeLa229]

人宫颈癌细胞；Hela P0s-F

人宫颈癌细胞；Hela S3 [HeLaS3]

人胰腺腺泡上皮癌；贬笔础颁

人T淋巴细胞白血病细胞；HuT 78

人肺鳞癌细胞；狈颁滨-贬520

人前列腺癌高转移细胞株；PC-3M IE8

人前列腺癌低转移细胞株；笔颁-3惭-2叠4

人肺巨细胞癌高转移细胞株；笔骋-叠贰

人肺巨细胞癌低转移细胞株；笔骋-尝贬7

人结直肠腺癌细胞；SW620 [SW 620；SW-620]

人脑星形胶质母细胞瘤；U-87 MG [U87MG；U87 MG]

人肺癌细胞；A-427 [A427]

人胰腺癌细胞；础蝉笔颁-

人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞；颁98

人髓母细胞瘤细胞；顿补辞测

人乳腺导管癌细胞；贬颁颁38

人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞；惭69

人胃癌细胞；惭骋颁-803

绿色荧光蛋白标记人胃癌细胞；惭骋颁803-骋贵笔

人胃癌细胞；惭碍狈-45

人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞；惭耻惭-2叠