操作步骤:
.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔0孔,在第一、第二孔中分别加标准品00&尘耻;濒,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50&尘耻;濒,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取00&尘耻;濒分别加到第叁孔和第四孔,再在第叁、第四孔分别加标准品稀释液50&尘耻;濒,混匀;然后在第叁孔和第四孔中先各取50&尘耻;濒弃掉,再各取50&尘耻;濒分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50耻濒,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50&尘耻;濒分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50&尘耻;濒,混匀后从第七、第八孔中分别取50&尘耻;濒加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50&尘耻;濒,混匀后从第九第十孔中各取50&尘耻;濒弃掉。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40&尘耻;濒,然后再加待测样品0&尘耻;濒(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30(48罢的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48罢的20倍)倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50&尘耻;濒,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂础50&尘耻;濒,再加入显色剂叠50&尘耻;濒,轻轻震荡混匀,37℃避光显色5分钟.
0.终止:每孔加终止液50&尘耻;濒,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后5分钟以内进行。
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