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四角瑞氏绦虫探针法荧光定量笔颁搁检测八戒影院准备试剂与收集血样

发布时间:2022-11-15&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;点击次数:471

准备试剂与收集血样:
双重核酸八戒影院(荧光PCR法) .  收集标本:血清、血浆(EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测, 2-8 ℃ 保存48 小时;更长时间须冷冻( -20   ℃或 -70   ℃ )保存,避免反复冻融。
2.  标准品液配制:使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀,配成 20 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管,管加标本稀释液 900ul ,第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 20 0ng/ml 的标准品溶液 00ul 混匀后用加样器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反复作对倍稀释,从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。
3.  0× 标本稀释液用蒸馏水作 : 0 倍稀释( 示例: ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水)。
4.  洗涤液:用重蒸水 :20 稀释(示例:ml 浓缩洗涤液加入 9ml 的重蒸水)
检测程序:
.  加样:每孔各加入标准品或待测样品 00ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 20 分钟。
2.  洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。
3.  每孔中加入抗体工作液0 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4.  洗板:同前。
5.  每孔加酶标抗体工作液00ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
6.  洗板:同前。
7.  每孔加入底物工作液00ul ,置 37   ℃ 暗处反应5 分钟。
8.  每孔加入00ul 终止液混匀。
9.  30分钟内用酶标仪在 45 0 nm 处测 吸光值。

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