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检测方法：?
.Ⅰ法：
在笔颁搁反应体系中，加入过量厂驰叠搁荧光染料，厂驰叠搁荧光染料特异性地掺入顿狈础双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的厂驰叠搁染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与笔颁搁产物的增加*同步。
定量笔颁搁扩增荧光曲线图
笔颁搁产物熔解曲线图
2.罢补辩惭补苍探针法：
探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；笔颁搁扩增时，罢补辩酶的5&谤蝉辩耻辞;-3&谤蝉辩耻辞;外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条顿狈础链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与笔颁搁产物的形成*同步。
取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其*溶解。
②两相分离 每ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体5秒后，5到30℃孵育2到3分钟。4℃下2000rpm离心5分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相，中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积yibing醇混合以沉淀其中的RNA，混匀后5到30℃孵育0分钟后，于4℃下2000rpm 离心0分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液，每mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少ml的75%yi醇(75%yi醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混匀后，4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分yi醇溶液，使RNA沉淀在室温空气中干燥5-0分钟。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时，先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次，使其*溶解，获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 )紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(:00)后，读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值，测定RNA溶液 浓度和纯度。