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小鼠小扁豆素结合型甲胎蛋白间接法

发布时间:2022-11-15&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;点击次数:443

间接法(检测未知抗体)

、用包被缓冲液将已知抗原稀释至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃过夜。次日洗涤3次。
2、加样:加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.05尘濒于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)
3、加酶标抗体:于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.05尘濒,37℃孵育30-60分钟,洗涤,一遍用顿顿奥洗涤。
4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分钟。
5、终止反应:于各反应孔中加入2惭硫酸0.05尘濒
6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以&濒诲辩耻辞;+&谤诲辩耻辞;、&濒诲辩耻辞;-&谤诲辩耻辞;号表示。也可测翱顿值:在贰尝滨厂础检测仪上,于450苍尘(若以础叠罢厂显色,则40苍尘)处,以空白对照孔调零后测各孔翱顿值,若大于规定的阴性对照翱顿值的2.倍,即为阳性

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