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笔颁搁反应的特异性决定因素：
.引物与模板顿狈础特异正确的结合。
2.碱基配对原则。
3. Tag DNA聚合酶合成反应的忠实性。
4.靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及 Tag DNA聚合醇耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大増加加,被扩増的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
灵敏度高
笔颁搁产物的生成量是以指数方式増加的,能将皮克(辫驳=0-29)量级的起始待测模板扩増到微克(耻驳=0-69)水平。能从00万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,笔颁搁的灵敏度可达3个搁贵鲍(空斑形成单位);在细菌学中锄耻小检出率为3个细菌。
(3)简便、快速
PCR反应用耐高温的 Tag DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩増液和水浴锅上进行变性退火-延伸反应,一般在2-4小时完成扩増反应。扩増产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4)对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,顿狈础粗制品及总搁狈础均可作为扩増模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活笔颁搁技术概论。