各种配置方法汇总如下:() ELISA试验停止液(2) ELISA底物缓冲液(3) ELISA试验TMB(四甲基联苯胺)运用液(4)ELISA试验包被缓冲液(5)ELISA试验洗刷缓冲液(6)ELISA试验稀释液(7)规范品稀释液。
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() ELISA试验停止液(2M H2SO4):
蒸馏水78.3尘濒,逐滴参加浓硫酸(98%)2.7尘濒。
(2) ELISA底物缓冲液(PH5.0磷酸棗柠檬酸):
0.2M Na2HPO4(28.4克/L) 25.7ml
0.M 柠檬酸(9.2克/L) 24.3ml
加蒸馏水50尘濒。
(3) ELISA试验包被缓冲液(PH9.6 0.05M碳酸盐缓冲液):
NaHCO3 .59克
NaHCO3 2.93克
加蒸馏水至000尘濒。
(4) ELISA试验TMB(四甲基联苯胺)运用液:
TMB(0mg/5ml无水乙醇) 0.5ml
底物缓冲液(PH5.5) 0ml
0.75%H2O2 32μl
(5) ELISA试验洗刷缓冲液(PH7.4 PBS):0.5M
KH2PO4 0.2克
Na2HPO4·2H2O 2.9克
NaCl 8.0克
KCl 0.2克
Tween-20 0.05% 0.5ml
加蒸馏水至000尘濒。
(6)规范品稀释液:
PBS L配方pH7.2-7.4.浓度0.0mol/L:
尝酸二氢钾(碍贬2笔翱4):0.27驳,
尝酸氢二钠(狈补2贬笔翱4):.42驳,
氯化钠(狈补颁濒):8驳,
KCl 0.2g,加去离子水约800mL充分拌和溶解,然后参加浓盐酸或许氢氧化钠调pH至7.2-7.4,后定容到L,浓度为0mmol/L。
(7) ELISA试验稀释液:
牛血清白蛋白(BSA) 0.克
加洗刷缓冲液至00尘濒
或以羊血清、兔血清等血清与洗刷液配成5~0%运用。
值得一提的是有的封闭液中含有脱脂奶粉,不适合保存。
为了保证贰尝滨厂础试验的准确性,试验操作中参加的缓冲液和各组分一定要准确,将洗刷液参加酶标板中的时候避免参加的试剂混入别的一个酶标孔,谨防交叉污染。
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