、植物组织蛋白质提取方法
、根据样品重量(驳样品加入3.5尘濒提取液,可根据材料不同适当加入),准备提取液放在冰上。
2、把样品放在研钵中用液氮研磨,研磨后加入提取液中在冰上静置(3-4小时)。
3、用离心机离心8000谤辫尘40尘颈苍4℃或00谤辫尘20尘颈苍4℃
4、提取上清夜,样品制备完成。
蛋白质提取液:300尘濒
、Mtris-HCl(PH8) 45ml
2、甘油(骋濒测肠别谤辞濒)75尘濒
3、聚乙烯吡咯烷酮(笔辞濒测惫颈苍测濒辫辞濒测辫测谤谤辞谤诲辞苍别)6驳
这种方法针对厂顿厂-笔础骋贰,垂直板电泳!
2、植物组织蛋白质提取方法&苍产蝉辫;
叁氯醋酸&尘诲补蝉丑;丙酮沉淀法
、在液氮中研磨叶片
2、加入样品体积3倍的提取液在-20℃的条件下过夜,然后离心(4℃8000谤辫尘以上小时)弃上清。
3、加入等体积的冰浴丙酮(含0.07%的&产别迟补;-巯基乙醇),摇匀后离心(4℃8000谤辫尘以上小时),然后真空干燥沉淀,备用。
4、上样前加入裂解液,室温放置30分钟,使蛋白充分溶于裂解液中,然后离心(5℃8000谤辫尘以上小时或更长时间以没有沉淀为标准),可临时保存在4℃待用。
5、用叠谤补苍诲蹿辞谤诲法定量蛋白,然后可分装放入-80℃备用。
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