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传代细胞内皮细胞-细胞冻存和复苏实验原理与注意事项

发布时间:2022-11-15&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;点击次数:408

    按照常规的组织学分类方法,脊椎动物和人体细胞类型约有200余种。这些细胞在人体中呈现有序的空间分布。细胞是人体的结构和功能单位。共约有40万--60万亿个,细胞的平均直径在0--20微米之间。除成熟的红血球外,所有细胞都有一个细胞核,是调节细胞作用的中心。锄耻颈大的是成熟的卵细胞,直径在0.毫米以上;锄耻颈小的是血小板,直径只有约2微米。而75000个精子细胞才抵得上一个卵细胞的重量。肠粘膜细胞的寿命为3天,肝细胞寿命为500天,而脑与骨髓里的神经细胞的寿命有几十年,同人体寿命几乎相等。血液中的白细胞有的只能活几小时。

传代细胞内皮细胞-细胞冻存和复苏实验原理:

    细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融,实验证明这样可以zui大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂,这两种物质能提高 细胞膜对水的通透性,加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外,减少细胞内冰晶的形成,从而减少由于冰晶 形成造成的细胞损伤。复苏细胞应采用快速融化的方法,这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化,避免 由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损伤。

传代细胞内皮细胞-细胞冻存和复苏实验注意事项:

. 从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存,但为对数生细胞。在冻存 前一天换一次培养液。

2. 将冻存管放入液氮容器或从中取出时,要做好防护工作,以免冻伤。

3. 冻存和复苏用新配制的培养液。

传代细胞内皮细胞-冻存和复苏的原则:

    慢冻快融 当细胞冷到零度以下,可以产生以下 变化:细胞器脱水,细胞中可溶性物质浓度升高,并在细胞内形成冰晶。 如果缓慢冷冻,可使细胞逐步脱水 ,细胞内不致产生大的冰晶;相反,结晶就大,大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融,目 的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重结晶。

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