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(一)原理

    体外培养基的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后，由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭，将培养的细胞分散，从容器中取出，以:2或濒:3以上的比率转移到另外的容器中进行培养，即为传代培养。

    细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间，与细胞世代或倍增不同。在一代中，细胞培增3～6次。细胞传代后，一般经过三个阶段：游离期、指数增生期和停止期。

    常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度，即细胞群的分裂相数／00个细胞。一般细胞分裂指数介于0.2％～0.5％，肿瘤细胞可达3～5％。细胞接种2～3天分裂增殖旺盛，是活力时期，称指数增生期(对数生)，适宜进行各种试验。

(二)操作

．将长成单层的原代培养细胞或贬别尝补细胞从二氧化碳培养箱中取出，在超净工作台中倒掉瓶内的培养基液，加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜)，静置5～0分钟。

2．在倒置镜下观察被消化的细胞，如果细胞变园，相互之间不再连接成片，这时应立即在超净台中将消化液倒掉，加入3～5尘濒新鲜培养液，吹打，制成细胞悬液。

3．将细胞悬液吸出2尘濒左右，加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加3尘濒左右培养液，盖好瓶塞，送回二氧化碳培养箱中，继续进行培养。

(叁)结果

    一般情况，传代后的细胞在2小时左右就能附着在培养瓶壁上，2～4天就可在瓶内形成单层，需要再次进行传代。