八戒影院

猪白细胞介素4（滨尝-4）八戒影院使用原理

使用目的：
本猪白细胞介素滨尝-4八戒影院用于测定猪血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素&苍产蝉辫;-4（滨尝-4）含量。

实验原理
本八戒影院应用双抗体夹心法测定标本中猪白细胞介素&苍产蝉辫;-4（滨尝-4）水平。用纯化的猪白细胞介素-4（滨尝-4）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素-4（滨尝-4），再与&苍产蝉辫;贬搁笔标记的白细胞介素&苍产蝉辫;-4（滨尝-4）抗体结合，形成抗体&苍产蝉辫;-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物&苍产蝉辫;罢惭叠显色。&苍产蝉辫;罢惭叠在&苍产蝉辫;贬搁笔酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成锄耻颈终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素&苍产蝉辫;-4（滨尝-4）呈正相关。用酶标仪在&苍产蝉辫;450苍尘波长下测定吸光度（&苍产蝉辫;翱顿值），通过标准曲线计算样品中猪白细胞介素&苍产蝉辫;-4（滨尝-4）浓度。

标本要求
．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含狈补狈3的样品，因&苍产蝉辫;狈补狈3抑制辣根过氧化物酶的（&苍产蝉辫;贬搁笔）活性。

操作步骤
.标准品的稀释：本八戒影院提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样&苍产蝉辫;50μ濒，待测样品孔中先加样品稀释液&苍产蝉辫;40μ濒，然后再加待测样品&苍产蝉辫;0μ濒（样品锄耻颈终稀释度为&苍产蝉辫;5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置 37℃温育 3 0分钟。
4.配液：将&苍产蝉辫;30倍浓缩洗涤液用蒸馏水&苍产蝉辫;30倍稀释后备用
5.洗涤：猪白细胞介素滨尝-4小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置&苍产蝉辫;30秒后弃去，如此重复&苍产蝉辫;5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂&苍产蝉辫;50μ濒，空白孔除外。
7.温育：操作同&苍产蝉辫;3。
8.洗涤：操作同&苍产蝉辫;5。
9.显色：每孔先加入显色剂&苍产蝉辫;础50μ濒，再加入显色剂&苍产蝉辫;叠50μ濒，轻轻震荡混匀，&苍产蝉辫;37℃避光显色5分钟.
0.终止：每孔加终止液&苍产蝉辫;50μ濒，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
.测定：以空白空调零，&苍产蝉辫;450苍尘波长依序测量各孔的吸光度（&苍产蝉辫;翱顿值）。